Alguns componentes são comuns a todos
os espectrofotômetros, como é verificado a seguir. A luz, habitualmente
fornecida por uma lâmpada, é fracionada pelo prisma ou rede de difração
(monocromador) nos comprimentos de onda que a compõem (luzes
monocromáticas). O comprimento de onda selecionado é dirigido para a
solução contida em um recipiente transparente (cubeta). Parte da luz é
absorvida e parte é transmitida. A redução da intensidade luminosa é
medida pelo detector (célula fotelétrica) porque o sinal elétrico de
saída do detector depende da intensidade da luz que incidiu sobre ele. O
sinal elétrico amplificado e visualizado no galvanômetro em números, é
lido como uma absorbância e é proporcional à concentração da substância
absorvene existente na cubeta. A precisão dos comprimentos de onda para
análise são chamados de bandas de passagem, mais comum na ordem de 10nm.
O espectro da análise mais comum é de 330nm a 1100nm para a faixa
visível.
Os espectrofotômetros são instrumentos de análise que permitem:
Antes de utilizar
um espectrofotômetro sempre é feita uma calibração, que é fundamental
para garantir que as medições obtidas no aparelho sejam precisas. Esta
calibração pode variar em vários espectrofotômetros. A maioria dos
fabricantes fornece um guia sobre como calibrar o aparelho.
É muito importante ao colocar a amostra a ser analisada, não tocar no tubo de ensaio na parte do meio, para evitar manchas de dedo que alteram a leitura do aparelho. Assim, o ideal é pegar na parte superior do tubo e colocá-lo no aparelho para que ele faça a leitura e dê o resultado almejado. Além disto, para que um espectrofotômetro funcione corretamente, deve ser aquecido antes de usar. Muitos dispositivos demoram cerca de 10 minutos para aquecer.
É muito importante ao colocar a amostra a ser analisada, não tocar no tubo de ensaio na parte do meio, para evitar manchas de dedo que alteram a leitura do aparelho. Assim, o ideal é pegar na parte superior do tubo e colocá-lo no aparelho para que ele faça a leitura e dê o resultado almejado. Além disto, para que um espectrofotômetro funcione corretamente, deve ser aquecido antes de usar. Muitos dispositivos demoram cerca de 10 minutos para aquecer.
| Esquema óptico dos principais componentes do espectrofotômetro. As letras representam: (a) fonte de luz, (b) colimador, (c) prisma ou rede de difração, (d) fenda seletora de X, (e) compartimento de amostras com cubeta contendo solução, (f) célula fotelétrica, (g) amplificador. |
- Selecionar o comprimento de onda (lâmbda) da radiação adequado à análise de um determinado componente
- Medir a intensidade I do feixe emergente que corresponde a um determinado feixe incidente Io, convertendo o sinal recebido no detector em medida de Absorvância para o comprimento de onda da análise. Em outras palavras, criar o "Branco" e em seguida fazer as medidas com a amostra.
- Determinar a concentração de uma espécie em solução a partir do gráfico da variação de absorvância (ou transmitância) em função da concentração de várias soluções-padrão.
